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狐貍源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實驗步驟

日期:2022-03-17瀏覽:766次

狐貍源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實驗步驟:


典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:


將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;


人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;


耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。

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