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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
雞肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
雞肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：“冷"蛋白TRPM8抗體 mRNA前體剪接因子PRPF8抗體 ME-180 (人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 大鼠膀胱成纖維細(xì)胞 GES-1人胃黏膜上皮細(xì)胞 大鼠胰腺腺泡細(xì)胞 HuTu-80 (人十二脂腸腺癌) 小鼠棕色脂肪干細(xì)胞
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：780
更新時間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
雞肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8278 |
細(xì)胞簡介：
雞肺微血管內(nèi)皮分離自肺組織；肺是機(jī)體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細(xì)胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細(xì)胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞肺微血管內(nèi)皮采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞肺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
雞肺微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit ELISA.
豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISAKit ELISA.
豬睪(T)ELISAKit ELISA.
豬肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISAKit ELISA.
豬藍(lán)耳病(PRRS)試劑盒
Human basic fibroblast growth factor 9 (bFGF-9) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒
Porcineplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit 豬血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAMA(Mouseai-Monocyteaibody)ELISAKIT小鼠抗單核細(xì)胞抗體
血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性熒光定量試劑盒20次
polyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒
FAHD1蛋白抗體
染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta 0.5mgTNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 壞死因子-β抗原
PBK重組人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
APOM Protein Human 重組人 APOM 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta 0.5mgTNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 壞死因子-β抗原
APOM Protein Human 重組人 APOM 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PBK重組人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
雞肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)試劑盒 ，英文名： sIL-1RⅡ ELISA Kit
Rabbit telomerase (TE) ELISA Kit 兔子端粒酶(TE)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-7(mouse IL-7) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-5ELISAKit大鼠白介素5
通用型雞傳染性法氏囊病(InfectiousBursalDisease/Gumboro Disease;IBD)試劑盒 20次
ELISAKitIGFBP-2大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行
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