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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠乳腺上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
小鼠乳腺上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：腦蛋白239抗體 配子生成素結(jié)合蛋白1抗體 γ-原肌球蛋白/原肌球蛋白3抗體 小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞 大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 C3H/10T1/2, Clone 8小鼠胚胎肉瘤細(xì)胞 人B淋巴白血病細(xì)胞+LUC;Nalm6-LUC-puro
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：1062
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠乳腺上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
乳腺組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7086 |
細(xì)胞簡介：
小鼠乳腺上皮分離自乳腺組織；乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺，主要由腺上皮細(xì)胞組成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡；近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞（MEC）有密切聯(lián)系，體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織，乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控，其中乳腺表達(dá)的生長因子對乳腺上皮細(xì)胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長型細(xì)胞，呈多角形、圓形以及短梭形；乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠乳腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
載脂蛋白B（ApoB）測定試劑盒（免疫比濁法）
載脂蛋白A-I（ApoA-I）測定試劑盒（免疫比濁法）
銅（Cu）測定試劑盒（絡(luò)合比色法）
α-巖藻糖苷酶（AFU）測定試劑盒（速率法）
植物25羥基D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒
Human ai endomysial aibody IgA (EMA IgA) ELISA Kit 人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒
PorcineIerferonα,IFN-αELISAKit 豬α干擾素(IFN-α)試劑盒 進(jìn)口分裝
ADVIgM腺病毒IgM混合型(間接法二步法)
血液合成酶總活性比色法定量試劑盒20次
Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISAKit小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒
PE-Cy7標(biāo)記人CD44單克隆抗體
G蛋白偶聯(lián)受體C5L2蛋白抗體
DDR2重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein
Klf4 (Kruppel likefactor 4 0.5mgKlf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原
BID重組人 BID 蛋白 Protein
ACBD7 Protein Human 重組人 ACBD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PILRB Protein Mouse 重組小鼠 PILRB1 蛋白
Klf4 (Kruppel likefactor 4 0.5mgKlf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原
ACBD7 Protein Human 重組人 ACBD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DDR2重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein
PILRB Protein Mouse 重組小鼠 PILRB1 蛋白
BID重組人 BID 蛋白 Protein
小鼠乳腺上皮細(xì)胞大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)試劑盒 ，英文名： SFRP2 ELISA Kit
Rat beta thromboglobulin / beta thrombus protein (beta -TG) ELISA Kit 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒
RatIerleukin9,IL-9ELISAKIT 大鼠白介素9(IL-9)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforDPPIV(MousedipeptidylpeptldaseIV)ELISAKit小鼠二肽基肽酶Ⅳ
細(xì)胞茜素紅(ALIZARIEDS)鈣染色試劑盒50次
Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行
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