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更新時(shí)間:2024-09-11
產(chǎn)品僅用于科研購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)產(chǎn)品、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。點(diǎn)擊了解更多克隆感受態(tài)細(xì)胞。
產(chǎn)品名稱 | DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞 |
規(guī)格 | 50ul*5/50ul*20 |
貨號(hào) | YSRIBIO9633 |
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細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
intestinal fatty acid binding protein, iFABP Elisa Kit氯化兩面針堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
telomerase, TE Elisa Kit 氯化矢車菊素,花青素(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
telomerase, TE Elisa Kit 羅漢果皂苷V(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
matrix metalloproteinase 5, MMP-5 Elisa Kit 絡(luò)塞維(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
matrix metalloproteinase 5, MMP-5 Elisa Kit 落新婦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
matrix metalloproteinase 4, MMP-4 Elisa Kit 馬錢苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
matrix metalloproteinase 4, MMP-4 Elisa Kit 馬錢苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B, MMP-9 Elisa Kit 麥冬皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B, MMP-9 Elisa Kit 麥角甾醇;麥角固醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
tissue inhibitors of metalloproteinase 1, TIMP-1 Elisa Kit麥角甾醇(90%)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
tissue inhibitors of metalloproteinase 1, TIMP-1 Elisa Kit蔓荊子黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
basic fibroblast growth factor, bFGF Elisa Kit 芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
basic fibroblast growth factor, bFGF Elisa Kit 芒果苷Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
macrophage inflammatory protein 5, MIP-5 Elisa Kit毛蕊異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
macrophage inflammatory protein 5, MIP-5 Elisa Kit毛蕊異黃酮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1, sICAM-1 Elisa Kit 沒(méi)食子兒茶素(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞PARL 骨骼肌細(xì)胞線粒體膜蛋白PARL一抗 * 0.2ml Pheniramine Maleate
GYPB/CD235b 血型糖蛋白δ一抗 * 0.2ml FTase Substrate, Fluorogenic
FUT1 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶1一抗 * 0.2ml Linaclotide
ICAM4/CD242 細(xì)胞間粘附分子4一抗 * 0.2ml benzoylpaeoniflorin
RHCG RH血型C糖蛋白一抗 * 0.2ml 3,4,5Tricaffeoylquinic acid
SLC14A1/RACH1 尿素轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白一抗 * 0.2ml Alisol A 24acetate
XKR1 膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白XK一抗 * 0.2ml Alisol C monoacetate
ACSM3 丁?;o酶A合成酶3一抗 * 0.2ml Sclareolide
操作方法:
1. 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少13 h。
基本共性:
1、所有的細(xì)胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)及糖被構(gòu)成的生物膜,即細(xì)胞膜。
2、所有的細(xì)胞都含有兩種核酸:即DNA與RNA。
3、作為遺傳信息復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的載體。
4、作為蛋白質(zhì)合成的機(jī)器—核糖體,毫無(wú)例外地存在于一切細(xì)胞內(nèi),核糖體,是蛋白質(zhì)合成的機(jī)器,在細(xì)胞遺傳信息流的傳遞中起重要作用。
5、所有細(xì)胞的增殖都以一分為二的方式進(jìn)行分裂。
6、能進(jìn)行自我增殖和遺傳
7、新陳代謝
8、細(xì)胞都具有運(yùn)動(dòng)性,包括細(xì)胞自身的運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞內(nèi)部的物質(zhì)運(yùn)動(dòng)
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
產(chǎn)品僅用于科研采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。