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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:827
更新時間:2024-09-11
產(chǎn)品僅用于科研購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購產(chǎn)品、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。點擊了解更多克隆感受態(tài)細胞。
產(chǎn)品名稱 | Stbl3 感受態(tài)細胞 |
規(guī)格 | 100ul*10/100ul*50 |
貨號 | YSRIBIO9650 |
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細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Cluster of differentiation 30, CD30 Elisa Kit銀杏內(nèi)酯C(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Epithelial-Cadherin, E-Cad Elisa Kit銀杏內(nèi)酯J(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Epithelial-Cadherin, E-Cad Elisa Kit隱丹參酮(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
beta cellulin, BTC Elisa Kit 隱丹參酮Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
beta cellulin, BTC Elisa Kit ?;蛆Z去氧膽酸(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Angiopoietin 2, ANG-2 Elisa Kit隱綠原酸(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Angiopoietin 2, ANG-2 Elisa Kit鷹嘴豆芽素A(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Angiopoietin 1, ANG-1 Elisa Kit鷹嘴豆芽素ARat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Angiopoietin 1, ANG-1 Elisa Kit柚皮苷,川陳皮素Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Angiogenin, ANG Elisa Kit羽扇豆醇(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Angiogenin, ANG Elisa Kit鳶尾苷(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin, KAF/AR Elisa Kit鳶尾黃素(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin, KAF/AR Elisa Kit原花青素B2(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
cyclic adenosine monophosphate, cAMP Elisa Kit原人參二醇(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
cyclic adenosine monophosphate, cAMP Elisa Kit原人參三醇(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
cyclic adenosine monophosphate, cAMP Elisa Kit原薯蕷皂苷(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Stbl3 感受態(tài)細胞Factor VII light chain 凝血因子VII * 0.2ml 3,5Dinitrosalicylic acid
Myosin VIIa/DFNB2 肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2一抗 * 0.2ml Sodium malonate
Factor X 凝血因子10一抗 * 0.2ml Sodium phosphate, monobasic, dihydrate
NIR2 膜脂轉(zhuǎn)移蛋白1一抗 * 0.2ml Malonate
NUSAP1 核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1一抗 * 0.2ml Manganese (II) chloride, tetrahydrate
RAB35 RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab35一抗 * 0.2ml Casein
RACGAP1 Rho GTP酶激活蛋白GAP一抗 * 0.2ml Vaseline
phosphoRACGAP1(Ser387) 化Rho GTP酶激活蛋白GAP一抗 * 0.1ml Sodium orthovanadate
操作方法:
1. 感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少13 h。
基本共性:
1、所有的細胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)及糖被構(gòu)成的生物膜,即細胞膜。
2、所有的細胞都含有兩種核酸:即DNA與RNA。
3、作為遺傳信息復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的載體。
4、作為蛋白質(zhì)合成的機器—核糖體,毫無例外地存在于一切細胞內(nèi),核糖體,是蛋白質(zhì)合成的機器,在細胞遺傳信息流的傳遞中起重要作用。
5、所有細胞的增殖都以一分為二的方式進行分裂。
6、能進行自我增殖和遺傳
7、新陳代謝
8、細胞都具有運動性,包括細胞自身的運動和細胞內(nèi)部的物質(zhì)運動
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
產(chǎn)品僅用于科研采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。