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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:免疫球蛋白D重鏈保守區(qū)抗體 輪狀病毒 (RVA) VP4抗體 磷酸二酯酶6β抗體 大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞 小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 CFPAC-1人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞 AE-2 (小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗AChE))

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:21

更新時間:2024-10-29

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

椎間盤組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

梭形、多角形

YS-01X7454

細(xì)胞簡介:

大鼠椎間盤髓核分離椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,富于彈性的膠狀物質(zhì);周圍部的纖維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散,位于椎間盤的中央,至成年時位置移至椎間盤的中后部;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒   96T/48T

小鼠單胺氧化酶AMAOA)試劑盒   96T/48T

小鼠大內(nèi)皮素(BigET)試劑盒   96T/48T

小鼠催乳素(PRL)試劑盒   96T/48T

小鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cailage glycoprotein 39 (HC gp-39) ELISA Kit 人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)試劑盒

Humankillercelllectin-likereceptor,KLRELISAKit 人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgG試劑盒人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG(ai-CMVIgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(低多糖/)50

Humanα1-Aiypsin,α1-ATELISAKit人α1(α1-AT)試劑盒規(guī)格:96T/48T

跨膜蛋白酶絲1抗體

鋅指蛋白293抗體

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞大鼠載脂蛋白H(APOH)試劑盒 ,英文名: APOH ELISA Kit

Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴細(xì)胞因子試劑盒

MouseIerleukin5,IL-5ELISAKIT 小鼠白介素-5(IL-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforhumanfrizzledhomolog8,FZD8ELISAKit人卷曲蛋白8

細(xì)胞/組織白蛋白載玻片制備試劑盒20

ELISAKitTIMP-2大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。


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