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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人退行性椎間盤髓核細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人退行性椎間盤髓核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：KHDRBS2蛋白抗體 細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體 環(huán)指蛋白187抗體 人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞) 人胰腺癌組織源細(xì)胞 SNU-119人卵巢癌細(xì)胞 NCI-H295R (人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：15
更新時(shí)間：2024-10-30
產(chǎn)品特性Product characteristics
人退行性椎間盤髓核細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
椎間盤組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7518 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人退行性椎間盤髓核分離退行性椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時(shí)位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長(zhǎng)，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人退行性椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人退行性椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠白介素10(IL-10)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1(IL-1)試劑盒 96T/48T
小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4（OCT4）試劑盒 96T/48T
小鼠基脲敏感性胺氧化酶（SSAO）試劑盒 96T/48T
小鼠A(CsA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒
humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgA試劑盒人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量試劑盒20次
Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4(UGT2B4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
蛛毒素受體2抗體
艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體
BCHE重組小鼠 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 Protein
Beta-casein( Beta-casein 0.5mgBeta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)
APOM重組人 APOM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
DDR1 Protein Rat 重組大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
Beta-casein( Beta-casein 0.5mgBeta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BCHE重組小鼠 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 Protein
DDR1 Protein Rat 重組大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
APOM重組人 APOM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
人退行性椎間盤髓核細(xì)胞大鼠腎酶(RNLS)試劑盒 ，英文名： RNLS ELISA Kit
Mouse iercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒
Ratcoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit 大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHBsAg乙型肝表面抗原
細(xì)胞β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性生物發(fā)光法定量試劑盒20次
SheepIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit綿羊白介素2受體(IL-2R)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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